Aplicação nas placas de Petri e Jarra de Cultivo em Anaerobiose

A placa para o cultivo contém o hagar Mitis Salivarius, o qual contém 20% de sacarose, o antibiótico bacitracina, que age em bactérias Gram + (menos os do grupo mutans). Também contém azul de tripan, o qual dá a coloração à placa e o corante cristal violeta que ajuda na identificação das bactérias Gram +.

Quando a saliva é colocada no hágar, deve-se usar a alça Drigalski para espalhar as bactérias na placa. Esse procedimento deve ser feito rapidamente, pois o hagar Mitis Salivarius é muito concentrado, portanto a água presente nas bactérias vai para o meio e elas ficam desidratadas, não ocorrendo crescimento nenhum.

A alça DEVE estar esterelizada. Coloca-se alça de drigalski no álcool e no fogo, colocando-a inclinada e nunca em posição horizontal para não esterilizar só a porção final mas toda ela.Esperar que a mesma esfrie para que as bactérias não sejam queimadas. Veja as fotos a seguir:

IMPORTANTE: TODOS OS PROCEDIMENTOS DEVEM SER REALIZADOS PERTO DA CHAMA!!








Posicione o pipetador em 010 = 0,1ml.





Coloque uma nova ponteira.




Pegue o tubo de ensaio 1 e a placa 1.




Pegue,com o pipetador, do tubo 1 a quantidade exata de saliva diluida e aplique na placa de Petri 1.




Rapidamente com a alça de drigalski espalhe pela placa em forma de zigue-zague ou movimentos de vai e vem sempre girando a placa para que cresçam colônias por toda a placa.




Repita o procedimento em todos as placas. Tubo 2 na placa 2, tubo 3 na placa 3, tubo 4 na placa 4 e tubo 5 na placa 5. NUNCA esqueça de esterelizar a alça de drigalski antes de cada rastelagem.



























Jarra de cultivo em anaerobiose.




Coloque todas as placas, com o hagar voltado para cima, dentro da jarra. Coloque um pedaço de papel alumínio e dentro dele um pedaço de algodão.




Coloque Álcool no algodão.




Acenda o fósforo e coloque fogo no algodão para que após fechar o pote aja um ambiente em anaerobiose (apenas Gás Carbônico).




Tampe rapidamente a Jarra de cultivo em anaerobiose.









Coloque a jarra para cultivo em anaerobiose com os meios de cultura dentro de uma estufa a 35º e aguarde 48 horas para o resultado final.